Xenopus leavis (Dél-afrikai Karmosbéka)

Tesztorganizmus neve

Latin név

Xenopus laevis

Magyar név

Dél-afrikai karmosbéka

Angol név

African clawed frog

Rendszertani besorolás {2} 

-          ország

Animalia (Állatok)

-          törzs

Chordata (Gerinchúrosok), altörzs: Vertebrata (Gerincesek)

-          osztály

Amphibia (Kétéltűek)

-          rend

Anura (Békák) , alrend: Mesobatrachia

-          család

Pipidae (Pipabékafélék)

-          nemzetség/nem

Xenopus

-          faj

X. leavis

Tesztorganizmus jellemzői {3} 

Élőhely

Kifejezetten vizi állatok, egész életüket tavakban, mocsarakban töltik el.

Fontosabb külső jegyek

• Megjelenésükben leginkább a kecskebékákhoz hasonlítanak.
• Lapos fej, rövid, kerek arcorr jellemzi őket.
• Parányi szemeik pupillanyílása kerek, felső szemhéjuk elcsökevényesedett, egy bőrredő alkotja.
• Mérete elérheti a 13 cm-t is.
• Színe szürkés, zöldes árnyalatú.
• Hátsó lábán három rövid karom található.

Táplálkozás

• Nagyon falánk állatok, mindent elfogyasztanak, amit le tudnak nyelni.
• Zsákmányukat kisebb halak, lisztkukacok alkotják, de rovarokat, húsféléket is fogyasztanak.
• Táplálkozás közben, mely a víz alatt zajlik, mellső lábai segítségét is igénybe veszi.

Szaporodás

• 10 hónapos koruk körül érik el a kifejlettséget.
• Párzási időszakban mindkét nemnek van hangja.
• A nőstény évente 4szer is petéket rak le, ezek akár több százas létszámot is elérik. A peték a viz hőmérsékletétől függően 2-4 nap alatt kellnek ki.
• Az ebihalakból 6 hét alatt lesznek kisbékák.
• Az ebihalak kopoltyúval lélegeznek.

Egyéb fontosabb jellemzők

• Évente vedlik, saját levetett bőrét megeszi.
• Albínó változatait otthoni tartásra árulják.
• Átlagos élettartama 5 - 15 év, de vannak feljegyzések csaknem 30 éves kort is megért karmosbékákról.
• Színváltoztatásra képesek, melyet a hipofízis, az agyalapi mirigy által termelt két hormon hatása vált ki, így képes elsötétülni vagy éppen kifakulni alkalmazkodva a környezethez.

Szabványok és referenciák

Szabványosított tesztmódszer?

nem

Szabvány típusa, száma

-

Nem szabványos tesztmódszerek

ASTM (American Society for Testing and Materials) E1439-98 számú standardizált protokollja: FETAX,

Hogben teszt

Környezettoxikológiai alkalmazás

Tesztorganizmus fenntartása

FETAX: A tesztközeg hőmérséklete a felnőtteknél átlagosan 23 ^oC, az embrióknál 24 ^oC. 12 órás megvilágítást 12 órás sötétség követ. A pH 6,5-9 között változhat. A tesztedény egy nagymérető akvárium a tenyésztésre szánt felnőttek számára,  legalább 30 cm magas, 20-30 liter térfogatú, buborékoltató levegőztetéssel. Egy  40x40 cm-es akváriumban 4-6 egyed élhet. {1}

Teszteléshez használt organizmus jellemzői

A vizsgálathoz minimum 2 éves felnőtt hímekre és 3 éves nőstényekre van szükség. A felnőtt hím 7,5-10 cm hosszú, a nőstény 10-12 cm hosszú. A felnőtt egyedeket hetente háromszor kell etetni vitaminokkal feljavított marhamájjal.  {1}

Tesztorganizmus érzékenysége

FETAX esetén kiváló érzékenységű szervezet teratogenitás kimutatására. A peték érzékenyebbek, mint a felnőtt állatok.{1}

Tesztmódszer alkalmassága

mutáció, teratogenitás, ökotoxicitás

Tesztelés elve

A FETAX egy gyorsteszt, melynek előnye, hogy emlősökre és más fajokra is extrapolálható eredményt ad viszonylag rövid időn belül. Segítségével veszélyes hulladékok valamint tiszta és keverék vegyi anyagok teratogén hatása tesztelhető.

Nem csak a teratogenitás indikálására használható, hanem ökotoxicitás pontos előrejelzésére is, hiszen a gyanúsított anyagok már sokkal kisebb koncentrációban hatnak a békaembriókra, mint a felnőtt, kifejlett egyedekre, tehát igen érzékeny tesztrendszer hozható létre az alkalmazásukkal. {1}

Tesztmódszer leírása

Az embriókat Petri-csészében tartjuk és a tesztelést is abban végezzük. 10 ml tesztelegyben 25 embriót helyezünk a vizsgálathoz. Az embriók a tesztelendő vegyi anyagnak állandóan, végig a teszt alatt ki vannak téve. A tesztelendő anyagot naponta ismételten alkalmazzuk. A koncentrációk száma 5, az ismétléseké legalább 2. {1}

Mérési végpontok

mortalitás, elhalálozás, mutagenitás

Vizsgálati végpontok

A szulfametoxazol 150 mg/L-es koncentrációja a vizsgált embriók 17,39%-ában, míg 250 mg/L-es koncentrációja az embriók 32,95%-ában gerincoszlop ferdülést okozott. A ketoprofen 10 mg/L koncentrációban ödémaképződést idézett elő a kezelt embriók 77,55%-ában. Az arcorri tájék deformációi, a szem-, a bélfejlődési és pigmentképzési rendellenességek csak kis számban fordultak elő. A ketoprofen 250 mg/L-es koncentrációjával történő kezelés hatására egy kétfejű embrió megjelenését is leírták.

ketoprofen: LC₅₀ = 12,1 mg/L, az EC₅₀ = 5,67 mg/L

szulfametoxazol: LC₅₀ és EC₅₀ értékeket az alacsony mortalitás miatt nem célszerű kiszámolni, értékelhető eredményeket az LC₁₀ (200 mg/L) és EC₁₀ (132,85 mg/L)

ammónium perklorát: időtartam négy nap, 1 mg/L- fejlődési rendellenesség, 2000mg/L 50% reprodultivitás csökkenés

{4}

szén-tetraklorid: LC₅₀= 22.4 mg/L/6 nap {5}

uretán/ etilkarbamát: akut toxicitási teszt:LC₅₀ = 5 580 mg/L {6}

koffein: akut toxicitási teszt:EC₅₀ = 0,07 μg/L, Xenopus laevis, béka fajjal végzett 96 órás növekedés-gátlási teszt

Krónikus toxicitási teszt: NOEC = 0,05 μg/L, Xenopus laevis, béka fajjal végzett 96 órás növekedés-gátlási teszt, (PAN) {7}

diazinon:  szerves foszfát rovarölő, talajfertőtlenítő szer: LC₅₀= 9,84 mg/L /96 h {8}

Méréshez szükséges műszerek

labor felszerelés (mikroszkóp, kromatográf)

Tesztek időigénye

96 h FETAX esetén, Szén-tetraklorid 6 nap, Ammónium-perklorát 4 nap

Egyéb 

Megjegyzések

Hogben teszt: Tartásához nagy helyet, és lehetőleg külön medencét igényel (kb. 100L),elég nagytestű. Vize 24 ^oC legyen. Táplálható kisebb halakkal, rovarokkal, földigilisztával, csigákkal, lisztkukaccal. Vizét természetesen szellőztetni nem, de szűrni kell, mivel sokat ürít, és gyakran vedlik is. A tesztről: A terhes nők vizeletét a nőstény békák bőre alá fecskendezik, aktivizálódik az állatok agyalapi mirigye elülső lebenyének hormonja, amitől megindul a petézés. Ha ez nem következik be, a vizsgált nő nem terhes. Gyakrabban használják azonban a hímbékapróbát, vagyis a spermiumok megjelennek-e, vagy sem, ún. béka pozitív teszt. Hímek esetében pár óra múlva  már van válasz, eredmény. {9}